桉树无性系工厂化育苗(DB44/T 193—2004)

时间:2009-11-6 15:41:26    来自:桉树中心    浏览数:2612

1 范围

本标准规范了桉树无性系工厂化育苗过程中无性系材料的选取、培养基的配制、无菌操作技术、外植体的培养、组培苗的育苗技术;规范了嫩枝扦插育苗采穗圃的建立与管理、嫩枝扦插育苗技术和苗木的质量标准等。

本标准适用于国营、集体和个体的桉树无性系组培工厂、扦插育苗场。

2 引用标准

GB/T 6001-1999育苗技术规程

GB/T 16620-1996 林木育种及种子管理术语

LY/T 1000-1991容器育苗技术

3 术语与定义

3.1 林木良种 improved material of forest tree

通过试验与鉴定,证明在一定造林区域内,其产量、质量、适应性、抗性等方面明显优于当前主栽材料的繁殖材料。

3.2 植物组织培养  plant tissue culture

在无菌培养基上,对植物离体器官、组织或细胞进行培养,以形成再生植株或培养新的育种材料的生物技术。

3.3 优树 superior tree , plus tree

在生长量、树形、抗性或在其它性状上,显著地优越于周围林木的树木。

3.4 幼化处理 rejuvenize

使繁殖材料保持和回复幼化状态的技术处理。

3.5 营养繁殖 vegetative propagation

指用植物营养器官,如根、茎、叶、芽等营养体进行繁殖的系列方式。林业上的无性繁殖,通常为营养繁殖。

3.6 外植体  culture material , cultures

生长在培养基上的被培养的器官、组织或细胞。

3.7 培养基 culture medium

为外植体的生长、发育提供所需物质的基质。

3.8 无性系 clone

由同一原株营养繁殖产生的植株总和。

3.9 母液 mother solution , mother liquid

为称量准确和方便贮藏,将培养基的成份配制成相应浓度的溶液或混合溶液。

3.10 接种 inoculation

指在无菌条件下,将处理好的植物组织材料放置或插入培养基的操作过程。

3.11 瓶苗 bottle seedling

用玻璃瓶作容器,通过植物组织培养形成的完整植株的总称。

3.12 组培苗  tissue culture seedling

通过植物组织培养过程所获得的再生植株。

3.13 炼苗  exercising seedling

把组培生根的瓶苗从人工控制的培养环境,转移到近自然环境下培养,以提高瓶苗的木质化程度和适应自然环境能力的过程。

3.14 基质 substrate , medium

栽植组培苗或扦插育苗的基本物质。由黄心土、沙、泥炭土等材料混合而成。

3.15 采穗圃 cutting orchard

提供优良穗条的母本种植园。

3.16 插穗 cutting

将枝条、苗干等种条截制成段,用于插条育苗和分殖造林,这种扦插材料称插穗。

3.17 采穗母株 stock plant

生产穗条的母本植株。

3.18 扦插  cutting

用植物的枝条或茎段,经处理后,插在适宜的基质中,促使其发生不定根和形成完整植株的过程。

3.19 嫩枝扦插  shoot cutting

用生长健壮、半木质化的枝条进行扦插育苗的过程。

3.13.23.33.43.53.63.73.83.153.16引用于GB/T 16620

4 无性系材料的选取

采用营养繁殖表现优良的桉树林木良种,作为无性系工厂化育苗生产的材料。

5 桉树组织培养

5.1 外植体 

5.1.1 采用经幼化处理的桉树良种的枝条作为营养繁殖的外植体。

5.1.2 为减少接种材料的污染,采取外植体时,应选择连续三天以上晴好天气后进行。

5.1.3 外植体消毒

            将外植体用自来水冲洗5分钟。

            在无菌条件下,用75%酒精消毒510秒,无菌水冲洗2次。

            1g/L升汞溶液,加吐温-20两滴浸没材料,轻微摇动,消毒25分钟,再用无菌水冲洗5次。

5.2 培养基的配制

5.2.1 培养基的成分

a) 芽增殖培养基:在培养基中加适量细胞分裂素和生长素,促进芽增殖生长的培养基。

b) 根诱导培养基:在培养基中加适量植物生长素,促进生根的培养基。

5.2.2 母液配制

            母液用蒸馏水配制。

            氮、磷、钾等无机盐配制的混合溶液称为大量元素母液,硫、钙、镁、锰、铜、锌、硼等无机盐配制的混合溶液称为微量元素母液,铁盐单独配成母液,有机成分和附加成分分别配成母液。母液按相应浓度配制。配制时,各种物质要充分溶解后混合,配制好的母液置于冰箱冷藏。

5.2.3 培养基配制

            依照所设计的培养基配方,按比例吸取母液注入容量瓶内,加水定容,倒进不锈钢锅内。

            加入凝固剂和糖。

            边加热边搅拌以免煮糊,使凝固剂和糖完全溶解。 

            用盐酸或氢氧化钠溶液调整pH值。

            将培养基尽快分装到培养瓶内,盖好瓶盖。

            培养基消毒

加热:把分装好的瓶装培养基放入高压消毒锅中密闭、加热。

排气:当消毒锅的消毒室内气压达到0.05Mpa时,打开冷凝阀,排尽消毒室内冷空气。

消毒时间:当消毒室内气压达到0.11Mpa、温度达到121℃时,开始计时,保持消毒20分钟。然后关闭开关,慢慢排放热气,待消毒室内的气压表读数为0时打开消毒锅盖,取出培养基,放置到经过消毒的接种室备料间内。

5.3 无菌操作

5.3.1 接种前的准备工作

            接种操作人员要保持自身和穿着衣物的清洁。工作前用肥皂洗手,换工作服和拖鞋,戴口罩。

            每次接种操作前都要用75%酒精擦手消毒。

5.3.2 超净工作台的准备工作

            超净工作台连续工作4小时,再次使用时要进行消毒,方法是:用消毒酒精喷洒在工作台上的工具、出风板、台面和两边玻璃,再用灭菌纱布抹一次。

            摆放好必用物品,放到超净工作台台面上的物品都要经过消毒。

            开启超净工作台上和接种室内的紫外灯,消毒20分钟。

            消毒结束后,开动超净工作台风机通风15分钟。

5.3.3 接种

            接种动作要轻巧快捷,接种材料与培养基接触良好,深浅适中,分布均匀。

            接种人员在接种过程中尽量不要说话,以防细菌传播,造成接种材料污染。

            为防交叉污染,每瓶材料接种完后,盛装过接种材料的碟子、纸张须更换,使用过的镊子、刀具用消毒纱布擦干净,高温灭菌处理后方可再次使用。

            接种后,盖上和扭紧瓶盖,标注材料名称、接种日期。做好超净工作台的清洁工作。

5.4 培养条件

5.4.1 培养室内的温度控制在28(±2)℃。

5.4.2 光照强度为20003000Lx,光照时间每天812小时。

5.5 组培生根瓶苗质量标准

苗高2.53.5厘米,生长正常,根白色,根系完整。

6 组培苗的移栽

6.1 炼苗

 将生根瓶苗置于炼苗温室或荫棚内炼苗1020天,移苗前拧松或打开瓶盖,再炼苗45天。

6.2 移苗基质

移苗基质为过筛的黄心土。育苗容器中装好基质后,在移栽前2天用0.05%0.10%高锰酸钾溶液淋透消毒。

6.3 移苗

6.3.1 移苗前洗干净粘附在生根苗根上的培养基,不要损伤组培苗的幼根。

6.3.2 移苗在早、晚或阴天进行,移植时,把根放进预先打好的小孔中,使根系舒展,填满土充分压实,使根土密接,要防止栽植过深、窝根或露根,每个容器内移苗一株,移植后随即浇透水。

6.4 移栽苗的管理

6.4.1 栽植后用塑料薄膜作小拱盖好小苗保湿,遮荫70%左右。

6.4.2 适当喷雾,保持湿度80%95%

6.4.3 为防止发生病害,移苗后当天喷防病药剂一次,以后每星期喷药一次,常用药剂和施用方法参照GB 6001-85 附录E

6.4.4 一周后打开小拱两头的塑料薄膜,以后逐渐打开小拱两边的塑料薄膜,15天后全部打开。

6.4.5 移植成活后,喷雾可改为用花洒淋水。每710天淋施3g/L的尿素或复合肥的水溶液,施肥后淋一次清水冲洗叶面。

6.4.6 生长弱的植株,适当增加喷施3g/L的尿素或磷酸二氢钾溶液。

6.5 组培苗出圃质量标准

苗高1015厘米,地径0.20.3厘米,生长正常,无病虫害。

7 嫩枝扦插育苗

7.1 扦插苗圃的建立

  根据产苗量决定桉树扦插苗圃建设的规模,扦插苗圃要作好采穗圃的规划,苗圃的规划、建立参照GB 6001的标准要求。

7.1.1 扦插荫棚

            扦插荫棚的面积根据产苗量而定,荫棚内每平方米年产苗量约为1000株。

            棚顶覆盖遮光网,遮光度为50%70%

            扦插棚内的地面为水泥地或碎石地,两边低中间略高,以利排水。在扦插苗出棚后,要清除杂物,刷洗地板并用漂白粉或生石灰等消毒剂消毒。对重复使用的物品和工具要进行清洗和消毒。

7.1.2 扦插场

            扦插场为就地扦插就地炼苗出圃,不需固定荫棚的育苗场地。

            扦插场的地面为实地,四周稍低中间略高,苗床插苗后作小拱,上盖遮光网,遮光度60%70%,待扦插苗大部分生根后揭开遮光网,就地炼苗出圃。

7.2 育苗容器

7.2.1 塑料薄膜育苗袋:用厚度0.020.06毫米的无毒塑料薄膜加工制作而成,在育苗袋的中下部打612个直径0.40.6厘米的小孔。常用容器规格参照LY/T 1000 附录A

7.2.2 塑料育苗管:用硬质塑料制成的圆锥形底部有排水孔的容器,圆锥形窗口内壁有4条棱状突起,塑料育苗管的规格为:4厘米×1.5厘米×13厘米。

7.2.3 塑料育苗管架用直径6毫米的钢筋与8#铁线焊接而成,每架摆放育苗管100个,育苗容器摆放按 LY 1000的要求。

7.3 扦插基质

7.3.1 黄心土风干、粉碎和过筛后,单独或黄心土+谷壳灰(或泥炭土)按91混合后使用。

7.3.2 基质消毒:用0.51g/L的高锰酸钾水溶液充分淋透基质,消毒后24小时即可使用。

7.4 采穗圃的建立

采穗圃应建立在交通、灌溉和管理方便,空气流通、阳光充足的地方,场地应选用新开垦的坡地。桉树嫩枝扦插育苗采穗圃采用灌丛式作业。

7.4.1 采穗母株

            选择苗高1015厘米,生长健壮,无病虫害的组培苗作采穗母株。

            母株起垅种植,垅的宽度100120厘米,垅间的人行道宽40厘米。母株种植的株距1520厘米,行距2025厘米。

            采穗母株3年更新一次。

            绘制好各无性系定植图,作好无性系品种标记。

7.4.2 采穗圃的管理

            采穗圃要精耕细作,及时做好松土、 人工除草、追肥、浇水和病虫害防治等工作。

            结合采集插条对母株进行修剪,除去残枝病叶。如果长时间不采集穗条,要定期修剪母株。发现病虫害严重为害的母株,应立即销毁。

7.4.3 插条的采集

            采穗母株定植后将顶梢剪下,母株基部保留23对小叶。一个月后母株萌发数条新梢,新梢生长达到穗条标准时,要及时采集。

            采集时间:宜在早上或天气凉爽时剪取枝条。

            采集方法:剪取母株上生长健壮、半木质化、长度为810厘米的枝条。将基部46厘米以上叶片剪去,基部切口要平滑,剪下的枝条放入盛有清水盆中。

            穗条消毒:枝条采集完毕,用0.05%的高锰酸钾溶液浸泡基部5分钟,再用清水冲洗干净。

7.5 生根激素处理

用植物生长调节物质调制成生根粉或生根水,扦插时用生根粉或生根水蘸插条基部,随蘸随插。

7.6 扦插

嫩枝扦插在秋、冬、春早晚或阴天气温凉爽时进行。扦插时先在基质上打孔,扦插深度为46厘米,把经生根激素处理的枝条插好后压实。

7.7 扦插后的管理

7.7.1 遮光保湿:插床遮光70%,保持空气相对湿度85%95%

7.7.2 病虫害防治:插后当天喷一次灭菌剂,以后每周喷灭菌剂一次。发现烂叶、死株,应立即清除,并喷灭菌剂。发病的苗床每三天喷一次灭菌剂。发现扦插穗条有害虫,应及时喷洒杀虫剂。常用药剂和施用方法参照GB/T 6001 附录E

7.7.3 扦插条大部分生根后,揭开遮荫网进行露地培育。

8 苗木出圃

8.1 出圃苗的规格:苗高1218厘米,地径0.20.3厘米,新梢35厘米,根系完整,无病虫害。

8.2 苗木出圃包括苗木分级、露地炼苗、包装和运输等工序。

8.3 苗木分级与露地炼苗相结合。苗木分为死苗、不合格苗和合格苗,死苗的容器与基质不再使用;不合格苗继续培育,加强水肥管理;合格苗进行露地炼苗715天即可出圃种植。

8.4 包装苗木的用具有塑料箱、竹箩筐和竹箕,装苗时不能有折断苗和脱袋裸根苗,同类包装用具装苗的数量要相同。

8.5 苗木包装后要及时运输,途中注意通风,避免风吹、日晒,以防苗木发热与风干,必要时还要淋水。

9 工作档案

9.1 桉树无性系工厂化育苗工作要建立基本情况、技术管理和科学试验等各项档案,积累生产与科研数据资料,为提高育苗技术和经营管理水平提供科学依据。

9.2 基本情况档案包括:生产资料使用、苗木经营和人员管理等内容。

9.3 技术管理档案包括:苗木生长发育情况和各阶段采取的技术措施;各项作业的用工量和各种药品及水、肥、电的使用情况。

9.4 科学试验档案包括:各项试验的设计和试验结果资料等。

9.5 桉树无性系工厂化育苗工作档案要有专人记载,分阶段系统整理,由技术负责人审查存档,长期保存。

主办单位:国家林业局桉树研究开发中心,中国林学会桉树专业委员会[广东·湛江]

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